会计基础考试题库-成都指挥学院

（生物科技行业）细胞生物
学实验

第五章物质的跨膜运输和信号传递
壹．教学目标：
1深刻理解被动运 输、主动运输和内吞外排的概念，以及物质
跨膜运输的重要意义；2．理解细胞信号传递的主要特点，掌 握甾
类激素信号通路、cAMP信号通路、磷脂酰肌醇信号通路和EGF
受体信号通路的主要环 节。
二．重点：
跨膜运输的方式和细胞通讯的信号通路。
三．难点：
跨膜运输的机制。
四．授课方式和教学方法：
讲授、讨论、多媒体辅助教学。

五．教学内容:

细胞膜是细胞和细胞外环境之间的壹种选择性通透屏障，物质的跨膜 运输对细胞
的生存和生长至关重要。多细胞生物是壹个繁忙而有序的细胞社会，这种社会性
的维 持不仅依赖于细胞的物质代谢和能量代谢，仍有赖于细胞通讯和信号传递，
以协调细胞的行为。
第一节
壹.被动运输（passivetransport）
定义：通过简单扩 散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度方向的跨膜转运。转运的动力来自物质的
浓度梯度，不需要细胞 提供能量。
类型：简单扩散（simplediffusion）、协助扩散（facilitat eddiffusion）
膜转运蛋白：
1.载体蛋白（carrierproteins）——通透酶（permease）性质；
介导被动运输和主动运输。
2.通道蛋白（channelproteins）——具有离 子选择性，转运速率高；离子通道是门控的；只介导被动
运输
膜转运蛋白通道蛋白(被动运输)膜转运蛋白
载体蛋白单运输
(被动运输+主动运输)共运输
协同运输
物质的跨膜运输

对向运输
细胞膜上的运输蛋白：
载体蛋白：通过构象变化运输物质
通道蛋白：形成通道、运输物质
载体蛋白:膜上壹类转运蛋白，可特异的、可逆的和某物质结 合，通过构象变化将物质从膜的壹侧运到另壹
侧。又称通透酶，和运输物质的结合和酶的动力学相似。
通道蛋白:形成亲水的通道，允许壹定大小和壹定电荷的离子通过。因运转的几乎都是离子，又称离子通 道.
通道蛋白形成通道：
持续开放（如水通道）
间断开放（闸门通道）配体闸门通道：配体和受体结合，通道开放。
电压闸门通道：膜电位变化，启动通道开放。
压力激活通道：压力变化,启动通道开放。
离子闸门通道：特定离子浓度变化，启动通道。神经--- 肌肉兴奋，不到１秒钟的时间内完成，这壹过程
包括四种通道顺次例如：神经--- 肌肉兴奋，不到１秒钟的时间内完成，这壹过程包括四种通道顺次开放：
A、刺激－神经冲动－神经末 梢，膜去极化，电压闸门通道钙离子通道开放，钙离子进入神经末梢，刺激乙
酰胆碱（ACH）分泌到突 触间隙中；
B、ACH和突触后肌细胞膜上的受体结合，配体闸门钠离子通道开放，钠离子进入肌细胞 ，肌细胞膜去极化；
C、肌细胞膜上电压闸门钠离子通道开放，更多的钠离子进入肌细胞，肌细胞膜进 壹步去极化，产生动作电
位，扩散到肌细胞膜；
D、肌浆网上的离子闸门通道钙离子通道开放，钙离子进入细胞质，引起肌肉收缩。
二.主动运输（activetransport）
●定义：是由载体蛋白所介导的物质逆浓 度梯度或电化学梯度由浓度低的壹侧向浓度高的壹侧进行跨膜
转运的方式。细胞耗能。由ATP直接提供 能量和间接提供能量及光能驱动.
被动和主动运输的比较
●主动运输类型：三种基本类型
由ATP直接提供能量的主动运输
钠钾泵
钙泵（Ca
2+
-ATP酶）
质子泵：P-型质子泵、V-型质子泵、H
+
-ATP酶
协同运输（cotransport）
由Na
+
-K
+
泵（或H
+
-泵）和载体蛋白协同作用，靠间接消耗ATP所完成的主动运输方式
物质的跨膜转运和膜电位
进行主动运输的物质：
各种离子（如钠离子、钾离子、氯离子、碳酸根离子、钙离子等）。
葡萄糖、氨基酸等带电荷极性分子。
进行主动运输的载体又称“离子泵”²钠钾泵
膜上运输钠和钾离子的载体称“钠钾泵”或“钠钾ATP酶”。
钠---钾泵的组成：
大亚基（100000DN）：
外侧：1、钾结合位点；2、鸟苯苷结合位点
内侧：1、钠结合点；2、ATP结合点
小亚基（45000DN）：和大亚基结合，作用不明。
“钠钾泵”的主动运输机制即：3N a+结合到结合位点上®酶磷酸化®酶构象变化®3Na+释放到细胞外
®2K+结合到位点上®酶去磷 酸化®2K+释放到细胞内，酶构象恢复原始状态。

Na+-K+泵的作用产生和维持膜电位；
为葡萄糖、氨基酸的主动运输创造条件；
维持细胞的渗透压，例如：当肾小管细胞间隙钠过高 时会导致细胞内水分外渗，细胞内缺水，人会感到口
渴而饮水多。钙泵,又称Ca2+-ATP酶位于质 膜和内质网上的跨膜蛋白,将Ca2+输出细胞或泵入内质网腔中
储存,以维持细胞内低浓度的游离Ca 2+.钙泵工作和ATP的水解相偶联,每消耗壹个ATP分子转运俩个Ca2+.
钙调蛋白是钙泵的激 活因子.钙调蛋白(CaM)是Ca2+应答蛋白,由148个氨基酸残基组成,含4个结构域,每个
结 构域能够和壹个Ca2+.CaM本身无活性,Ca2+和CaM结合后形成Ca2+-CaM复合体,再和靶酶 结合将其
活化.
质子泵,又称H+-ATP酶位于植物细胞、真菌和细菌质膜上的跨膜蛋白, 将H+泵出细胞建立跨膜的H+电化
学梯度，驱动转运溶质进入细胞。
P-型质子泵：位于真核细胞的质膜上，转运H+过程中涉及磷酸化和去磷酸化。
V-型质子 泵：位于动物细胞溶酶体膜和植物液泡膜上，转运H+过程中不涉及磷酸化的中间体。提高细
胞质中的p H和细胞器内的酸度。
H+-ATP酶：位于线粒体的内膜，植物类囊体膜和细菌质膜上，利用膜上H+梯度合成ATP。 < br>协同运输（cotransport）由Na+-K+泵（或H+-泵）和载体蛋白协同作用，靠间接消耗 ATP所完成的主
动运输方式
主动运输的能量不是由ATP直接提供，而是由储存在膜上离子梯度中的能量来驱动的。
这类运输进行时，壹种物质的运输必须依赖另壹种物质的同时运输，故称为协同运输。
协同运输
俩种物质同时相向转运，称对向运输（逆向协同运输）。如Na+--K+；Na+ —H+；Cl-—HCl3-
俩种物质同时同向转运，称共运输（同向协同运输）。如Na+--G；Na+--aa
浓度差+电位差→电化学梯度
动物细胞中，Na+的电化学梯度通常是驱动另壹种分子主运输 的能量，如Na+梯度驱动G、aa的主动运输
三、胞吞作用（endocytosis）和胞吐作用（exocytosis）
作用：完成 大分子和颗粒性物质的跨膜运输，又称膜泡运输或批量运输（bulktransport）。属于主动运输。
●胞吞作用
●胞吐作用
胞吞作用
●胞饮作用（pinocytosis）和吞噬作用（phagocytosis）。
胞饮作用和吞噬作用主要有三点区别
特征
胞饮作用
吞噬作用
内吞泡的大小
小于150nm
大于250nm
转运方式
连续发生的过程
需受体介导的信号触发
过程
受体介导的内吞作用及包被的组装
胞内体：是动物细胞内由膜包围的细胞器，其作用是传输由胞吞作用新摄入的物质到溶酶体被降解。
胞内体上有质子泵。
胞吐作用
胞吐作用：是将细胞内的分泌泡或其他某些膜泡中的物质通过细胞膜运出细胞的过程。
●组成 型的外排途径（constitutiveexocytosispathway）所有真核细胞连续分泌过程用 于质膜更
新（膜脂、膜蛋白、胞外基质组分、营养或信号分子）
内吞泡形成机制
需要笼形蛋白形成包被
及接合素蛋白连接
需要微丝及结合蛋白的
参和

defaultpathway：除某些有特殊标志的駐留蛋白和调节型分泌泡外，其余蛋白 的转运途径：粗
面内质网→高尔基体→分泌泡→细胞表面
●调节型外排途径（regulatedexocytosispathway）
特化的分泌细胞
储存——刺激——释放
产生的分泌物（如激素、粘液或消化酶）具 有共同的分选机制，分选信号存在于蛋白本身，分选
主要由高尔基体TGN上的受体类蛋白来决定
●膜流：动态过程对质膜更新和维持细胞的生存和生长是必要的
●囊泡和靶膜的识别和融合
胞吞作用途径膜上糖蛋白或糖脂识别和膜接触膜内陷包围物质膜融合去封口囊泡
进入细胞胞内体 ：是动物细胞内由膜包围的细胞器，其作用是传输由胞吞作用新摄
入的物质到溶酶体被降解。胞内体上有 质子泵。
第二节细胞通讯和信号传递
壹、细胞通讯和细胞识别
（壹）细胞通讯（cellcommunication）
壹个细胞发出的信息通过介质传递 到另壹个细胞产生相应的反应。细胞间的通讯对于多细胞生物体的发
生和组织的构建，协调细胞的功能， 控制细胞的生长、分裂、分化和凋亡是必须的。
●细胞通讯方式：
分泌化学信号进行通讯
内分泌（endocrine）激素分泌后作用较远的靶细胞，其传递介质为血液。
旁分泌（paracrine）激素分泌释放后作用于邻近的靶细胞，其传递介质为细胞间液。
自分泌（autocrine）激素分泌释放后仍作用于自身细胞，其传递介质为胞液；
化学突触（chemicalsynapse）
接触性依赖的通讯
细胞间直接接触，信号分子和受体都是细胞的跨膜蛋白
间隙连接实现代谢偶联或电偶联
（二）细胞识别（cellrecognition）
●概念：
细胞通过其表面的 受体和胞外信号物质分子（配体）选择性地相互作用，进而导致胞内壹系列生理
生化变化，最终表现为细 胞整体的生物学效应的过程。
●信号通路（signalingpathway）
细胞识别是通过各种不同的信号通路实现的。
细胞接受外界信号，通过壹整套特定的机制，将 胞外信号转导为胞内信号，最终调节特定基因的表达，
引起细胞的应答反应，这种反应系列称之为细胞信 号通路。
（三）细胞的信号分子和受体
●信号分子（signalmolecule）
亲脂性信号分子（）
亲水性信号分子
气体性信号分子(NO)
受 体（receptor）受体是细胞膜或细胞内的功能性糖蛋白，可特异地识别配体且和之结合，引起相
应的生物效应。多为糖蛋白

细胞内受体：为胞外亲脂性信号分子所激活
激素激活的基因调控蛋白（胞内受体超家族）此型受体主要包括类固醇激素受体，如糖皮质激素受
体（GR）、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、雄激素受体（AR）、盐皮质激素受体（MR）等；
维生素D3受体（VDR）以及甲状腺激素受体（TR）。这些激素进入细胞以后，能和特异性受体结合
形成活性复合物，然后作用于染色体DNA，调节基因表达，从而影响细胞的物质代谢和生理活动。
细胞表面受体:为胞外亲水性信号分子所激活
细胞表面受体分属三大家族：
离子通道偶联的受体（ion-channel- linkedreceptor）G-蛋白偶联的受体
（G-protein- linkedreceptor）
酶偶连的受体（enzyme-linkedreceptor）
受体的功能：
介导物质跨膜运输(受体介导的内吞作用)
信号转导：受体的激活（activation）（级联反应）；
受体失敏（desensitization）关闭反应、
减量调节（down- regulation）降低反应。
●第二信使（secondmessenger）cAMP、cG MP、三磷酸肌醇（IP
3）
，二酰基甘油（DG）
●分子开关（molecula rswitches）细胞内信号传递中起举足轻重作用的壹类蛋白质，通过磷酸化或结合
GTP而活化 ，开启信号通路，通过去磷酸化或结合GDP而失活，关闭信号通过。
二、通过细胞内受体介导的信号传递
亲脂性的小分子通过和细胞内受体结合传递信号。细胞内 受体本质是激素激活的基因调控蛋白，构成细
胞内受体家族。
●甾类激素介导的信号通路
俩步反应阶段：
初级反应阶段：直接活化少数特殊基因转录的，发生迅速；
次级反应：初级反应产物再活化其它基因产生延迟的放大作用。
●壹氧化氮介导的信号通路
三、通过细胞表面受体介导的信号跨膜传递
亲水性的化学信号分子壹般不能直接进入细胞，而是通过和细胞表面
特异受体的结合，进行信号传导，进而对靶细胞产生效应。根据信号
转导机制和受体蛋白类型的不同，细胞表面受体分为三大家族：
（壹）离子通道偶联的受体介导的信号跨膜传递
受体自身为离子通道，信号（神经递质）和 受体识别结合，开闭通道，离子流动，改变细胞膜的兴奋性。
特点：
受体离子通道复合体，四次六次跨膜蛋白
跨膜信号转导无需中间步骤
主要存在于神经细胞或其他可兴奋细胞间的突触信号传递
有选择性：配体的特异性选择和运输离子的选择性
G-蛋白偶联的受体介导的信号跨膜传递
由G蛋白介导,将信息传递给第二信使,引起壹系列胞内生物效应。
G蛋白：鸟苷酸结合蛋白的总称，其共同特征是：
由gba三个亚单位组成；

位于细胞膜受体和效应器之间的转导蛋白；
®具有结合GDP或GTP的能力，有GTP酶活性；
可激活效应蛋白，实现信息转导功能。
●cAMP信号通路
●磷脂酰肌醇信号
G-蛋白偶联受体又称蛇型受体。此型受体 通常由单壹的多肽链或均壹的亚基组成，其肽链可分为细
胞外区、跨膜区、细胞内区三个区。跨膜区由7 个α螺旋结构组成；多肽链的N-端位于细胞外区，而
C-端位于细胞内区；在第五及第六跨膜α螺旋结 构之间的细胞内环部分（第三内环区），是和G蛋白偶
联的区域。大多数常见的神经递质受体和激素受体 是属于G蛋白偶联型受体。细胞表面其它和酶偶联
的受体
自身是酶，具有TPK活性，主要是 壹些生长因子的受体，和配体结合即活化，使靶蛋白的酪氨酸残基磷酸
化，引起细胞反应。
通 常和酶连接的细胞表面受体又称催化性受体，目前已知的这类受体都是跨膜蛋白，当胞外配基和受体
结合 即激活受体胞内段的酶活性。至少包括5类：
受体酪氨酸激酶受体蛋白酪氨酸残基自磷酸化。
受体丝氨酸苏氨酸激酶如TGF的作用
受体酪氨酸磷酸酯酶受体蛋白酪氨酸残基去磷酸化
受体鸟苷酸环化酶（ANPs-signals）合成cGMP
酪氨酸蛋白激酶联系的受体
cAMP信号通路
反应链：
激素→G- 蛋白偶联受体→G-蛋白→腺苷酸环化酶→cAMP→cAMP依赖的蛋白激酶A→基因调控蛋白→
基因 转录
组分及其分析
G-蛋白偶联受体
G-蛋白活化和调节
G蛋白的 效应蛋白（酶）主要有腺苷酸环化酶（AC）和磷脂酶C（PLC）。前者可催化第二信使cAMP的产
生，后者可催化第二信使DG和IP3的产生，从而将配体的信号传递到细胞内。1、CAMP信号途径信号和< br>受体结合，受体活化，构象改变，暴露和G蛋白的结合部位。
配体－受体复合物和G蛋白结合，G活化，Gsα构象改变，结合GTP
Gsα- GTP复合物和βγ分离，暴露和AC的结合部位。
Gsα- GTP和AC结合，AC活化，分解ATP为CAMP
Gsα分解GTP为GDP，构型改变，和AC 分离，AC失活，Gsα和βγ结合，恢复静息状态。GPLR的失敏：
例：肾上腺素受体被激活后 ，10-15秒cAMP骤增，然后在不到1min内反应速降，以至消失。
受体活性快速丧失（速发相）---失敏（desensitization）；
机制：受体磷酸化受体和Gs解偶联，cAMP反应停止且被PDE降解。
俩种SerThr磷酸化激酶：
PKA和肾上腺素受体激酶（ARK），负责受体磷酸化；
胞内协作因子扑获蛋白（ arrestin）---结合磷酸化的受体，抑制其功能活性（arrestin已克隆、定位
1 1q13）。
反应减弱（迟发相）---减量调节（down-regulation）
机制：受体-配体复合物内吞，导致表面受体数量减少，发现arrestin可直接和Clath rin结合，在内吞中起
adeptors作用；
受体减量调节和内吞后受体的分选有关。

磷脂酰肌醇信号通路
“双信使系统”反应链：胞外信号分子→G-蛋白偶联受体→激活细胞质膜上的
→IP3
→胞内Ca
2+
浓度升高→Ca
2+
结合蛋白(CaM)→细 胞反应
磷脂酶C(PLC)→
使细胞质膜上的PIP2水解→DG→激活PKC→蛋白磷酸 化或促Na
+
H
+
交换使胞内pH升高
PIP2：4，5-二磷酸磷脂酰肌醇PKC蛋白激酶C
IP3：1，4，5-三磷酸肌醇
DG：二酰基甘油
受体酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信号通路
受体酪氨酸激酶（receptortyrosinekinases，RTKs）
包括6个亚族
信号转导：配体→受体→受体二聚化→受体的自磷酸化→
激活RTK→胞内信号蛋白→启动信号传导
RTK-Ras信号通路：
配体→R TK→adaptor←GRF→Ras→Raf（MAPKKK）→MAPKK→MAPK→进入细胞核→其< br>它激酶或基因调控蛋白（转录因子）的磷酸化修钸。
G蛋白偶联受体介导的MAPK的激活
RTKs的失敏（desensitization）
G蛋白偶联受体介导的MAPK的激活
MAPK（Mitogen- activatedproteinkinase）又称ERK（extracelularsignal- regulatedkinase）----真
核细胞广泛存在的SerThr蛋白激酶。
 MAPK的底物：膜蛋白（受体、酶）、胞浆蛋白、核骨架蛋白、及多种核内或胞浆内的转录调控因子----< br>在细胞增殖和分化中具有重要调控作用。
PTX敏感性G蛋白（Gi，Go）的亚基依赖 于Ras激活MAPK，具体机制仍有待深入研究；
PKC、PLC和G蛋白偶联受体介导的MAPK激活
PKC和PLC参和G蛋白偶联受体激活MAPK：
G蛋白偶联受体激活G蛋白；G蛋白 亚基或亚基激活PLC，促进膜磷脂代谢；磷脂代谢产物（DAG+IP3）
激活PKC；PKC通 过Ras或Raf激活MAPK；
由于PKC对钙的依赖性不同，所以G蛋白偶联受体–MAPK途径对钙要求不同；
PKA对G蛋白偶联受体–MAPK途径的负调控
迄今未发现和制备出MAPK组成型突 变（dominantnegativemutant），提示细胞难于忍受MAPK的持续
激活（MA PK的去活是细胞维持正常生长代谢所必须）。主要机制：特异性的TyrThr磷脂酶可选择性地
使M APK去磷酸化，关闭MAPK信号。
cAMP，MAPK；cAMP直接激活cAMP依赖的 PKA；PKA可能通过RTK或通过抑制Raf-Ras相互作用
起负调控作用。
RTKs的失敏：
催化性受体的效应器位于受体本身，因此失敏即酶活性速发抑制。
机制：受体的磷酸化修饰。EGF受体Thr654的磷酸化导致RTK活性的抑制，如果该位点产生Ala 突变，则
阻止活性抑制，后又发现C端的Ser10467也是磷酸化位点。磷酸化位点所在的C端恰好 是SH2蛋白的结
合部位。
引起受体磷酸化的激酶：
PKC---- 作用于Thr654；
CaMK2（Ca
2+
和CaM依赖的激酶2）----作用于Ser10467
仍发现：EGF受体是CDK的靶蛋白，提示和周期调控有关。

RTK晶 体结构研究表明，RTK激活后形成稳定的非抑制性构象；磷酸化修饰后，形成抑制性构象，引起失
敏。
RTK失敏对细胞正常功能所必须，RTK的持续激活将导致细胞生长失控。
四、由细胞表面整合蛋白介导的信号传递
整合蛋白和粘着斑
导致粘着斑装配的信号通路有俩条
粘着斑的功能：
壹是机械结构功能；二是信号传递功能
通过粘着斑由整合蛋白介导的信号传递通路：
由细胞表面到细胞核的信号通路
由细胞表面到细胞质核糖体的信号通路
五、细胞信号传递的基本特征和蛋白激酶的网络整合信息
●细胞信号传递的基本特征：
具有收敛（convergence）或发散（divergence）的特点
细胞的信号传导既具有专壹性又有作用机制的相似性
信号的放大作用和信号所启动的作用的终止且存
细胞以不同的方式产生对信号的适应(失敏和减量调节)
●蛋白激酶的网络整合信息和信号网络系统中的crosstalk
六．课堂小结
：
1．第壹节应理解细胞膜是细胞和细胞外环境之间的壹种选择性通透屏障，
物质的跨膜运输对细 胞的生存和生长是至关重要的。掌握被动运输、主动运输和
内吞外排的概念以及实例。
2．第 二节应掌握胞外信号分子和第二信使的概念，理解亲脂性和亲水性信
号分子的受体存在于不同的部位，而 且细胞表面受体的不同类型决定了三种信号
转导机制。
教学内容和考核要求

第壹节物质的跨膜运输
1．被动运输（识记）
（1）简单扩散
（2）协助扩散

2．主动运输（识记）
（1）由ATP直接提供能量的主动运输
（2）协同运输
3．内吞作用和外排作用（识记）
（1）受体介导的内吞作用
（2）外排作用
第二节细胞通讯和信号传递
1．细胞通讯和细胞识别
（1）细胞通讯（领会）
（2）细胞识别
（3）细胞的信号分子和受体（识记）
2．通过细胞内受体介导的信号传递（识记）
3．通过细胞表面受体介导的信号传递（识记）
（1）离子通道偶联的受体
（2）G蛋白偶联的受体
（3）具有酶活性的受体 < br>1.被动运输2.主动运输3.协同运输4.载体蛋白5.离子通道6.钠钾泵7.质子泵8.钙泵9.< br>钙调蛋白10.胞吞作用11.胞吐作用12.胞饮作用13.吞噬作用14.胞内体15.细胞通讯16 .细
胞识别17.受体18.分子开关19.第二信使20.G蛋白P156思考题第2、4、5、6、 7、9、10、
11题。

第三节